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　　实验动物那些事儿

　　前不久，兰州兽医研究所多人感染布鲁氏菌的新闻传遍业界，截止12月7日中午12点，已确认96人血清学阳性。在为该所师生担忧的同时，很多业内人士也担心自己的动物是否会感染、自己面临怎样的风险、如何预防等问题，本文对布鲁氏菌病及其实验室感染的相关问题进行了简单梳理。

　　1.每年我国布病发病人数有多少？

　　2019年1-7月发病人数29710，死亡人数为。2003-2018年历年数据如下图：

　　2.人感染布病后会终身带菌、不孕不育是真的吗？

　　根据我国布鲁氏菌拜迪生物一瓶巅峰病诊疗指南（试行）可将布病分为急性期和慢性期，急性期是指有临床症状且病程在6个月以内，慢性期指病程超过6个月仍未痊愈。急性期病人经过规范用药治疗，90%的病人可痊愈；部分病例可转为慢性，慢性布病难以治愈，病人面临长期反复发病、体能弱，难以正常工作和生活。

　　兰州兽研所的首批四个病例被确诊为隐形感染，即没有临床症状，但是实验室检查为抗体阳性。

　　3.布鲁氏菌有哪些种？哪些可以感染人？

　　4.布病主要传染源和传播途径有哪些？

　　布病是动物传染病，因此最终传染源是被感染的动物。主要传染源是牛、绵羊、山羊、猪等重要家畜及其副产品；野牛、水牛、骆驼、犬、马、驯鹿和牦牛是次要传染源，海豚、海豹等海洋哺乳动物也可成为传染源，职业人员接触感染组织后也存在感染风险。

　　感染类型有如下几类：

　　职业暴露：从事与牛、绵羊、山羊、猪等家畜有关工作的人，如：农民、农场工人、动物饲养员、牧民、剪羊毛者、兽医、配种员，培养布鲁氏菌的实验室人员存在特殊风险。

　　从污染的环境感染：人暴露于污染的尘土、粪便可吸入布鲁氏菌并致病；皮肤或粘膜感染也可导致感染；井水等水源也可被污染后导致人感染。

　　食物传播：通常是城市人群感染布鲁氏菌的主要原因。食用未经加热处理的奶制品、未煮熟的肉类均可导致患病风险增加。市场上正规销售的奶制品均经过巴氏消毒，可放心食用，但要警惕所谓“现挤”的各种动物奶。

　　人传人：极其罕见，偶有报道，间接证据显示亲密身体接触或性接触可作为传播途径。献血或器官移植，特别是骨髓移植，可能是导致人传人的主要原因。病患将布鲁氏菌传播给陪护几乎不可能，但也要采取预防措施。实验室工作人员处理患者样本时有巨大风险。

　　5.布病诊断依据有哪些？

　　5.1发病前与疑似感染的动物及其副产品有密切接触；生活在疫区；从事布鲁氏菌培养、检测、疫苗生产使用等工作。

　　5.2出现持续发热、乏力、多汗、关节痛等相关临床症状。

　　5.3实验室检查结果为阳性。

　　诊断原则：布病的发生、发展、转归比较复杂，其临床表现多种多样，很难以某一种症状来确定诊断。对布病的诊断应结合流行病学接触史、临床表现一瓶巅峰能量咖啡正品和实验室检查等情况综合判断。

　　6.实验室常用检查方法有哪些？

　　6.1虎红平板凝集试验（RBT）RBT是推荐使用的一种快速筛查试验，但在一些情况下会出现假阳性：血清来自感染小肠结肠炎耶尔森O：9或其他交叉反应抗原的患者、曾与光滑型布鲁氏菌有接触但未发病的健康人。因而阳性结果应用其他方法进行确认。本次兰州兽研院有患者的检验报告单显示即是使用本方法及6.3方法。

　　6.2酶联免疫吸附实验（ELISA）ELISA方法敏感性和特异性良好，稳定性好，操作简单，适合实验室日常筛查。但其检测结果的可靠性与检测目标物（IgG、IgM或者S-LPS）、试剂标准化、试剂质量确认关系密切。

　　6.3试管凝集试验（SAT）SAT操作简单、成本低廉，但缺乏敏感性和特异性。另外还有一个问题尚未解决，即什么滴度能表明存在活动性感染。如果病人出现症状和体征，滴度为1/160（200U）或以上更有明确诊断价值，但在布病高发区，许多无症状个体的血清滴度水平也会达到这个值。

　　6.4补体结合试验（CFT）敏感性和特异性良好，但技术相对复杂，不推荐在小型实验室日常应用。

　　6.5抗人免疫球蛋白试验（Coomb’s）Coomb’s结果和ELISAIgG检测结果相关性良好。

　　6.6布鲁氏菌分离培养需要的生物安全等级较高，且培养方法敏感性低。

　　6.7聚合酶链式反应（PCR）中国卫生行业标准WS269-2019中，将PCR试验新增为布鲁氏菌的鉴定方法。但该方法的使用需要有符合要求的PCR实验室及严格的质量控制防止出现假阳性结果。

　　7.布鲁氏菌相关实验的生物安全要求是什么？

　　根据卫生部2006年发布的《人间传染的病原微生物名录》：

　　涉及到抗原制备的大量活菌操作，或易产生气溶胶的病原菌离心、冻干及活菌感染的动物等实验需要在生物安全三级实验室操作。

　　布鲁氏菌样本的病原菌分离纯化、药敏实验、生化鉴定、免疫学实验、PCR核酸提取、涂片、显微镜观察等初步检测应在生物安全二级实验室操作。一瓶巅峰咖啡不含布鲁氏菌致病性活菌材料的分子生物学、血清学等实验在生物安全一级实验室操作。

　　8.实验室需要处理可能含有致病性布鲁氏菌的材料，该如何做好防护？

　　自有记录以来，布鲁氏菌病是最常见的实验室感染的疾病之一。因而实施（使用）合适的生物安全措施（设备）的重要性不容忽视。每个实验室都应有书面设备使用规程，尤其是易产生气溶胶的设备。消毒设备和污染物、处理加工样本、围堵和清除溢出物以及处理废弃物等规程应清晰简明、易于理解、严格执行。无论是实验人员还是临时进入实验室都应始终穿戴好个人防护用品。

　　布鲁氏菌培养物和感染的胎膜、胎儿组织和体液样本的处理应在生物安全3级实验室中处理。进行血清学或病原学诊断时，血液样本或活检标本中所包含的布鲁氏菌数量不足以导致操作人员出现重大风险，但应在生物安全2级实验室中小心处置。

　　所有操作强毒布鲁氏菌者都应受到密切的临床和血清学监测。在某些国家（包括我国），要求对有特殊风险的人员提供预防接种，但应了解当前疫苗保护效果有限，持续时间短且有一定副作用。

　　参考资料：

　　1. MJ Corbel著李晔，田莉莉译人兽布鲁氏菌病

　　2. 卫生部《人间传染的病原微生物名录》

　　3. 中华人民共和国卫生行业标准WS269-2019布鲁氏菌诊断

　　4. 布鲁氏菌病诊疗指南（试行）